エポキシ樹脂に内包した3 μmビーズをNA1.0の水浸対物レンズを用いて観察しました。XY方向は200 μm × 200 μmの範囲をガルバノスキャナを用いてスキャンし、Z方向は対物レンズを1.5 μmずつ動かしながら1000枚取得しました。
SLMによる補正がない場合では、水とエポキシ樹脂の屈折率差によって球面収差が発生します。これにより、深部では集光形状が縦に伸びてしまうためエネルギー密度が低下し、深部のビーズを観察することが困難になります。一方、SLMによる補正を適用すると励起光の集光形状が改善し、深部でも高いエネルギー密度を保つことができます。
3 µm beads encapsulated in epoxy resin was observed using a water immersion objective lens with NA 1.0. 200 µm x 200 µm in the XY direction was scanned using a galvanometer scanner, and 1000 images were acquired in the Z direction by moving the objective lens by 1.5 µm.
Without SLM correction, spherical aberration occurs due to the difference in refractive index between water and epoxy resin. This causes the focused light shape to elongate vertically at deeper depths, reducing the energy density and making it difficult to observe the beads at deeper depths. On the other hand, SLM correction improves the focusing shape of the excitation light and maintains a high energy density even in deep areas.
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